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决战新冠病毒─血清学检测2台大团队曾开发这4种方法揪SARS病毒感染

发布于2020-04-11 12:51:01 来源:laishu.com 作者:Laishu
导读: 【健康医疗网/记者蔡岳宏报导】时间回到2003年SARS疫情,和平医院爆发院内感染,至今仍令许多人留下阴影。台大医院病毒检验科、医技系及医院研究团队,共同开发出4种血清学检验,可侦测病毒抗体,用来了解

【健康医疗网/记者蔡岳宏报导】时间回到2003年SARS疫情,和平医院爆发院内感染,至今仍令许多人留下阴影。台大医院病毒检验科、医技系及医院研究团队,共同开发出4种血清学检验,可侦测病毒抗体,用来了解和平医院医护的感染情形(包含无症状感染者),成为核酸检测的辅助利器。《健康医疗网》采访参与开发的台大医学院医学检验暨生物技术学系兼任副教授、前台大医院病毒检验科主任高全良,介绍何谓血清学检测。

血清学检测 有这4种方法

针对血清学检测法,高全良提到,可用“免疫萤光染色法”、“酵素免疫法(又分ELISA、免疫层析法)”及“中和试验法”等,检测人体被病毒感染后产生的病毒抗体(用来对付病原体的武器),有抗体代表曾被病毒感染过。

“免疫萤光法”

“免疫萤光法”是先以病毒感染细胞后,再将被病毒感染的细胞取下,作成抹片,经丙酮固定后,再测定抗体。

“酵素免疫分析法”

“酵素免疫分析法”是以基因重组工程方式,合成病毒特异性蛋白的“饵”,用来“钓”患者血清中的“病毒抗体”。又可分两种方式,一类为“酵素连结免疫分析法”(Enzyme -linked immunosorbent assay, ELISA),原理为先制作吸附有病毒蛋白(饵)的塑胶表面,加入稀释的患者血清,若血清中有“病毒抗体”会被病毒蛋白“上钩”,清洗掉异物后,再加上侦测“人类免疫球蛋白”的抗体(上面结合酵素),清洗后,最后加入化学药剂,如检体有“病毒抗体”存在,经酵素水解后,会呈色或发光代表阳性。此法可用自动化仪器操作,检验量能高。

另一酵素免疫法为“免疫层析法”,原理与“ELISA”类似,但采似验孕试剂(阳性会有线条)呈现,用侧流层析法取代前述反应清洗的繁杂过程,并以抗人类抗体结合金离子(金标法)取代酵素的呈色反应,如果有病毒抗体存在时,在反应塑胶组合片上,会有结合金离子的聚集,就会呈现紫红色的线条。试验只需15分钟。

“中和试验”

至于“中和试验”,则以患者血清经过一系列稀释后,再加上定量的活病毒,反应后,观察抑制病毒生长的情形,来判定病毒中和抗体的存在。此法需在生物安全第三等级的实验室进行,且步骤繁琐,完全以手工进行,因此只有少数研究型实验室能够执行。

血清学检测快速、简单 可大量检验

高全良说,此4种方法台大团队在SARS期间都有研发,分别发表于美国CDC的期刊及其他国际期刊。与核酸检测(RT-PCR)比较,RT-PCR优点是高敏感度及特异性,在患者感染初期,可很快提供诊断的依据。但缺点有,检体采样多样性、采检技术复杂、实验技术较复杂、成本高,且传统核酸检测法约3-4小时才有结果(快速法约30分)及无法同时处理大量样本。

血清学法技术则较简单,也可自动化检测,检体只要抽血,成本低,所费时间较短(免疫层析法约15分钟,ELISA法约1-2小时)。缺点是需在患者病毒感染后期,有抗体后才会呈现阳性。

参考资料:

1.Hsueh P, Kao C, Lee C, et al. SARS Antibody Test for Serosurveillance. Emerging Infectious Diseases. 2004;10(9):1558-1562. doi:10.3201/eid1009.040101.

2. Hsueh PR, Kao CL, Yang PC et al. Microbiologic characteristics, serologic responses, and clinical manifestations in severe acute respiratory syndrome, Taiwan. Emerging Infectious Diseases. 2003; 9:1163-7.

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